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申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟

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材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長(zhǎng)的真核細(xì)胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲(chǔ)存液(100μM):稱(chēng)取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過(guò)濾,儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調(diào)pH值到7.4,定容至1L,過(guò)濾(0.2μm濾膜)后儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆谩7椒ǎ?.細(xì)胞分盤(pán):通過(guò)胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿,使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開(kāi)始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無(wú)血清培養(yǎng)基。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物。如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑質(zhì)量好?申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟

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穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶(hù)自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!?全球PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝幫助用戶(hù)更好地了解PEI轉(zhuǎn)染試劑的操作流程分子量為25000的線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑即Polysciences23966轉(zhuǎn)染效率比較高.

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1.對(duì)于某些類(lèi)型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物。?如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!

1.對(duì)于某些類(lèi)型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。?如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!?哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性?xún)r(jià)比較高?

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PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學(xué)家選擇PEIMAX,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來(lái),經(jīng)過(guò)眾多業(yè)內(nèi)人士評(píng)審的公開(kāi)研究和出版文獻(xiàn)表明,在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,可靠性強(qiáng)。PEIMAX是一種非GMP等級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎(chǔ)科學(xué)研究及藥物研發(fā)早期階段。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種即用型線(xiàn)性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(PEI)衍生物。由PEIMAX配置而成的即用型無(wú)菌試劑,采用0.1μmPES無(wú)菌過(guò)濾器,完全消除支原體污染風(fēng)險(xiǎn)。適用于工藝開(kāi)發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無(wú)縫過(guò)渡到MAXgene用于cGMP生產(chǎn)。如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!轉(zhuǎn)染效率好的PEI轉(zhuǎn)染試劑是哪個(gè)品牌?天津高實(shí)用性PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝

MAXgene GMP是一種cGMP級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑。申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟

接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,總體積如表1所示,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL離心管。轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染3h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請(qǐng)自行確定檢測(cè)時(shí)間。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!近期還可申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝!申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟

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    97 人參與回答
最佳回答
無(wú)錫廢氣處理系統(tǒng)

無(wú)錫廢氣處理系統(tǒng)

廢氣 等 32 人贊同該回答

廢氣治理廠家除了具備專(zhuān)業(yè)的生產(chǎn)和技術(shù)能力,通常還具備以下特點(diǎn):豐富的行業(yè)經(jīng)驗(yàn):廢氣治理廠家在長(zhǎng)期從事廢氣處理設(shè)備的研究和生產(chǎn)過(guò)程中,積累了豐富的行業(yè)經(jīng)驗(yàn)。它們了解不同行業(yè)廢氣的特性和處理需求,能夠提供 。

浙江校園園區(qū)一卡通系統(tǒng)方案
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第1樓
學(xué)校 等 17 人贊同該回答

學(xué)校園區(qū)一卡通支持校車(chē)乘坐功能,為學(xué)生提供了極大的便利。首先,學(xué)生只需攜帶一張卡片,就可以輕松地乘坐校車(chē),不再需要攜帶現(xiàn)金或購(gòu)買(mǎi)車(chē)票。其次,學(xué)生可以通過(guò)一卡通系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)校車(chē)乘坐的自動(dòng)化管理,減少了人工操 。

汕尾特警警用雨鞋廠家
汕尾特警警用雨鞋廠家
第2樓
判斷 等 85 人贊同該回答

判斷警用雨鞋是否已經(jīng)發(fā)霉,可以從以下幾個(gè)方面入手:1.外觀:觀察雨鞋表面是否有霉斑或白色粉末狀物質(zhì),如果有,很可能是發(fā)霉了。2.氣味:聞一聞?dòng)晷欠裼忻刮?,如果有,也可能是發(fā)霉了。3.觸感:用手觸摸雨 。

上海水處理加藥裝置
上海水處理加藥裝置
第3樓
從成 等 23 人贊同該回答

從成本角度分析加藥裝置配備報(bào)警系統(tǒng)的重要性:加藥裝置在生產(chǎn)過(guò)程中的作用非常重要,但是如果藥劑不足或出現(xiàn)異常情況,就會(huì)導(dǎo)致生產(chǎn)過(guò)程中的浪費(fèi)和成本的增加。例如,如果加藥裝置沒(méi)有配備報(bào)警系統(tǒng),當(dāng)藥劑不足時(shí), 。

江蘇信息服務(wù)一站式采銷(xiāo)平臺(tái)
江蘇信息服務(wù)一站式采銷(xiāo)平臺(tái)
第4樓
建筑 等 85 人贊同該回答

建筑產(chǎn)業(yè)信息服務(wù)注冊(cè)平臺(tái)的意義:提高信息的準(zhǔn)確性。建筑產(chǎn)業(yè)信息服務(wù)注冊(cè)平臺(tái)可以通過(guò)對(duì)信息的審核、篩選、整合等方式,提高信息的準(zhǔn)確性和可靠性。這樣可以避免信息的虛假、誤導(dǎo)等問(wèn)題,提高信息的質(zhì)量,從而為建 。

工具FBA轉(zhuǎn)運(yùn)優(yōu)勢(shì)
工具FBA轉(zhuǎn)運(yùn)優(yōu)勢(shì)
第5樓
海運(yùn) 等 21 人贊同該回答

海運(yùn)FBA轉(zhuǎn)運(yùn)補(bǔ)倉(cāng)是指在國(guó)際貿(mào)易中,當(dāng)一個(gè)貨主需要將貨物從A地運(yùn)往B地,但由于各種原因無(wú)法直接將貨物運(yùn)輸?shù)紹地,而是需要先將貨物運(yùn)輸?shù)紺地,然后再?gòu)腃地轉(zhuǎn)運(yùn)到B地。在這種情況下,貨主可以選擇使用海運(yùn)F 。

車(chē)間生產(chǎn)管理mes系統(tǒng)方案
車(chē)間生產(chǎn)管理mes系統(tǒng)方案
第6樓
設(shè)備 等 84 人贊同該回答

設(shè)備行業(yè)生產(chǎn)管理系統(tǒng)的實(shí)施和應(yīng)用需要企業(yè)進(jìn)行以下幾個(gè)方面的工作:1.選擇合適的設(shè)備行業(yè)生產(chǎn)管理系統(tǒng):企業(yè)需要根據(jù)自身的生產(chǎn)規(guī)模、生產(chǎn)工藝、管理水平等因素,選擇適合自己企業(yè)的設(shè)備行業(yè)生產(chǎn)管理系統(tǒng)。2.建 。

浙江定制三維動(dòng)畫(huà)渲染
浙江定制三維動(dòng)畫(huà)渲染
第7樓
三維 等 21 人贊同該回答

三維動(dòng)畫(huà)的另一個(gè)魅力就是它能夠呈現(xiàn)出豐富的細(xì)節(jié)。通過(guò)精心設(shè)計(jì)的角色形象、精細(xì)的表情動(dòng)畫(huà)和細(xì)致入微的物品模型,三維動(dòng)畫(huà)可以給觀眾帶來(lái)更加真實(shí)的體驗(yàn)。觀眾可以在細(xì)節(jié)中發(fā)現(xiàn)不同的故事,感受到角色的情感和內(nèi)心 。

浙江附近ros廠家直銷(xiāo)
浙江附近ros廠家直銷(xiāo)
第8樓
RO 等 88 人贊同該回答

ROS機(jī)器人操作系統(tǒng))主要支持兩種編程語(yǔ)言,即Python和C++,作為其主要編程語(yǔ)言。這兩種語(yǔ)言為開(kāi)發(fā)人員提供了多樣的選擇,以滿(mǎn)足不同項(xiàng)目和應(yīng)用的需求。Python在ROS中常用于快速原型開(kāi)發(fā)和腳本 。

河北巨型激光鐳雕機(jī)哪家便宜
河北巨型激光鐳雕機(jī)哪家便宜
第9樓
激光 等 86 人贊同該回答

激光鐳雕機(jī)在使用時(shí)需要注意以下事項(xiàng):保證內(nèi)循環(huán)水清潔,定期清洗水箱并更換去離子水或純水。嚴(yán)禁啟動(dòng)激光電源和調(diào)Q電源;Q電源不允許空載(即調(diào)Q電源輸出端懸空)。如果出現(xiàn)異常情況,應(yīng)先關(guān)閉振鏡開(kāi)關(guān)和鑰匙開(kāi) 。

烤肉加盟賺錢(qián)嗎
烤肉加盟賺錢(qián)嗎
第10樓
不管 等 52 人贊同該回答

不管您是小白還是想轉(zhuǎn)行開(kāi)店的人員都可以加入,無(wú)門(mén)檻要求,總部370度各個(gè)方面的扶持,選址布局、培訓(xùn)、設(shè)備、總部賦能,讓你全程無(wú)憂(yōu),我們還會(huì)給到加盟商開(kāi)店支持,幫助選址、幫助門(mén)店裝修設(shè)計(jì)、進(jìn)行培訓(xùn)、到店 。

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